Медицина слагается из науки и искусства, а над ними простирается покров героизма. (Г. Глязер)

Элементы диагностики плацентной крови

Раздел: Диагностика
19-07-2017

Для сохранения постоянства рН растворов в течение исследования пользовались веронал-мединало- вым буферным раствором, рН которого 8,6, ионная сила 0,1 ц. Этот буфер, по мнению многих авторов, дает наиболее контрастное разделение сыворотки на альбумины, cii- аг- 3- и у-глобулины рис. 1 Kunkel, Tiselius, 1951; Hadwiek, 1954, и др. Использовали хроматографическую бумагу ленинградской бумажной фабрики 1 имени Володарского, марки М медленная, сорт I, ГОСТ 10395, 1963 г. Полосу бумаги длиной 44 см, шириной 15 см делили на пять дорожек для каждого объекта исследования. Одновременно на аппарате производили 5 исследований 5 дорожек, Хроматографическую бумагу смачивали буферным раствором; излишки его удаляли подсушиванием на воздухе в течение 2-3 мин до выявления пористой структуры бумаги. Затем концы бумаги погружали в буферный раствор внутренних кювет аппарата. Негемо- лизированную сыворотку крови новорожденных в количестве 0,01 мл наносили микропипеткой на бумагу. В качестве контроля нами использована стандартная изогемагглютинирующая сыворотка. Электрофоретическое разделение сыворотки производили при комнатной температуре 16-18. напряжении 350 В. силе тока 5 мА, в течение Зг ч В течение всей работы постоянное напряжение поддерживали с помощью стабилизатора. Для количественного определения белка, содержащегося в отдельных фракциях фореграмм, нами применен метод фотоэлектроколо- риметрирования окрашенного раствора, полученного путем элюирова- ния красителя Фореграммы разрезали на полоски шириной 0,5 см и помещали в пробирки, содержащие по 5 мл 0,1 раствора едкою натра Элюирование красителя происходило в течение 1 ч Затем окрашенный раствор едкого натра помещали в кювету фотоэлектро- колориметра ее объем 5,05 мл и при красном светофильтре определяли величину экстинкщш. По ее показателям составляли кривую Гауса сыворотки крови живорожденных и мертворожденных детей Сумму величин экстннкций отдельных фракций принимали за 100 и вычисляли, какой процент по отношению к ней составляют отдельные фракции Рис. 2 Электрофореграмма сыворотки крови живорожденных а и мертворожденных б детей. Фракции альбуминов отчетливее выражены у живорожденных, а глобулинов- у мертворожденных Методом электрофореза на бумаге исследовали сыворотку крови 78 трупов живорожденных и 78 трупов мертворожденных детей. Всего изучено 499 фореграмм.



Добавить комментарий к публикации "Элементы диагностики плацентной крови":
Введите ваше имя:

Комментарий:

Защита от спама - решите пример:

Другие статьи по теме:
 Элементы тестирований плацентной крови
 Гистологический диагноз
 Лабораторные методы исследования
 Первые экспериментальные исследования
 Общепризнанная классификация аутоиммунных заболеваний